步驟一：青海發(fā)光桿菌接種
組織培養(yǎng)的接種是指將滅過(guò)菌的材料，在無(wú)菌的情況下，切成小塊，放入培養(yǎng)基的過(guò)程。科研、部門(mén)的接種工作，多在無(wú)菌室或超凈工作臺(tái)上進(jìn)行，中學(xué)可制作接種箱，在箱內(nèi)進(jìn)行接種。接種的方法步驟如下：
①在無(wú)菌室或接種箱中放好接種時(shí)所需要的酒精燈、貯存70%酒精和棉球的廣口瓶、各種鑷子、接種針、解剖刀、手術(shù)剪、火柴、培養(yǎng)基等。
②在無(wú)菌室或接種箱內(nèi)用紫外燈滅菌（無(wú)菌室照射20～50分鐘，接種箱照射15分鐘）。
③放入已滅菌的接種材料（用培養(yǎng)皿盛?。?。同時(shí)，操作人員用酒精棉球擦手，并對(duì)接種工具用酒精燈火焰燒灼。
④用手術(shù)刀片將材料切割成若干片段，并迅速接種入培養(yǎng)基中。接種時(shí)，錐形瓶（或試管）應(yīng)斜向火焰，在酒精燈火焰附近操作。
⑤材料接種好后，將錐形瓶瓶口在酒精燈火焰上轉(zhuǎn)動(dòng)燒一遍，蓋好瓶蓋，注明材料名稱(chēng)及接種日期。
材料接種后，應(yīng)置于26～28℃的培養(yǎng)室中進(jìn)行培養(yǎng)。
步驟二：青海發(fā)光桿菌植株誘導(dǎo)
本階段是組織培養(yǎng)中zui重要的一環(huán)。在培養(yǎng)基中植物激素的作用下，外植體通過(guò)三條途徑迅速增殖，這就是側(cè)芽增殖、誘導(dǎo)不定芽的形成和誘導(dǎo)胚狀體的形成。
*    RT    5克    乙酸鈰
*    RT，避光    1克    2-氨基聯(lián)苯
*        5克    硼氫化鈉
*    RT    5克    異丙胺
*    RT    1克    脫脂奶粉
*    2～8℃，避光    1克    肝浸粉（牛）
*    RT，避光    25克    瓊脂粉
*    RT，避光    100克    小牛浸膏粉
*    RT，避光    5克    三號(hào)膽鹽
*    RT    100克    豬膽鹽
*    RT，避光    100克    酶水解干酪素
*        100克    小牛血清
青海發(fā)光桿菌