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    透析袋的使用方法

    點(diǎn)擊次數(shù):1192  更新時(shí)間:2015-06-03

    ELISA透析的動(dòng)力是擴(kuò)散壓,擴(kuò)散壓是由橫跨膜兩邊的濃度梯度形成的。透析的速度反比于膜 的厚度,正比于欲透析的小分子溶質(zhì)在膜內(nèi)外兩邊的濃度梯度,還正比于膜的面積和溫度, 通常是 4℃透析,升高溫度可加快透析速度。 透析膜可用動(dòng)物膜和玻璃紙等,但用的zui多的還是用纖維素制成的透析膜,目前常用的 是美國(guó) Union Carbide (聯(lián)合碳化物公司)和美國(guó)光譜醫(yī)學(xué)公司的各種尺寸的透析管, 截留分子量 MwCO(即留在透析袋內(nèi)的生物大分子的zui小分子量,縮寫為 MwCO)通常為 1 萬(wàn)左右。 商品透析袋制成管狀,其扁平寬度為 23 mm~50 mm 不等。為防干裂,出廠時(shí)都用 10% 的甘油處理過,并含有極微量的硫化物、重金屬和一些具有紫外吸收的雜質(zhì),它們對(duì)蛋白質(zhì) 和其它生物活性物質(zhì)有害,用前必須除去??上扔?50%乙醇煮沸 1 小時(shí),再依次用 50%乙 醇、0.01 mol/L 碳酸氫鈉和 0.001 mol/L EDTA 溶液洗滌,zui后用蒸餾水沖洗即可使用。實(shí) 驗(yàn)證明, 50%乙醇處理對(duì)除去具有紫外吸收的雜質(zhì)特別有效。

      使用后的ELISA透析袋洗凈后可存于 4℃蒸餾水中,若長(zhǎng)時(shí)間不用,可加少量 NaN2,以防長(zhǎng)菌。洗凈涼干的透析袋彎折時(shí)易裂 口,用時(shí)必須仔細(xì)檢查,不漏時(shí)方可重復(fù)使用。 新透析袋如不作如上的特殊處理,則可用沸水煮五至十分鐘,再用蒸餾水洗凈,即可使 用。 使用時(shí), 一端用橡皮筋或線繩扎緊, 也可以使用特制的透析袋夾夾緊, 由另一端灌滿水, 用手指稍加壓,檢查不漏,方可裝入待透析液,通常要留三分之一至一半的空間,以防透析 過程中,透析的小分子量較大時(shí),袋外的水和緩沖液過量進(jìn)入袋內(nèi)將袋漲破。含鹽量很高的 蛋白質(zhì)溶液透析夜時(shí),體積增加 50%是正常的。為了加快透析速度,除多次更換透析液外,還可使用磁子攪拌。透析的容器要大一些,可以使用大燒杯、大量筒和塑料桶。小量體積溶液的透析, 可在袋內(nèi)放一截 兩頭燒園的玻璃棒或兩端封口的玻璃管, 以使透析袋沉入液 面以下。 檢查透析效果的方法是: 1% BaCl2 檢查(NH4)2SO4, 1% AgNO3 檢查 NaCl、 用 用 KCl 等。 為了提高ELISA透析效率,還可以使用各種透析裝置。使用者也可以自行設(shè)計(jì)與制作各種簡(jiǎn)易 的透析裝置。美國(guó)生物醫(yī)學(xué)公司(Biomed Instruments Inc.)的各種型號(hào)的 Zeineh 透析 器,由于使用對(duì)流透析的原理,使透析速度和效率大大提高.


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