維生素CELISA試劑盒在ELISA中一般有3次加樣步聚，即加標(biāo)本，加酶結(jié)合物，加底物。加樣時(shí)應(yīng)將所加物加在LEISA板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可濺出，不可產(chǎn)生氣泡。
加標(biāo)本一般用微量加樣器，按規(guī)定的量加入板孔中。每次加標(biāo)本應(yīng)更換吸嘴，以免發(fā)生交叉污染，也可用一次性的定量塑料管加樣。有此測定（如間接法ELISA）需用稀釋的血清，可在試管中按規(guī)定的稀釋度稀釋后再加樣。也可在板孔中加入稀釋液，再在其中加入血清標(biāo)本，然后在微型震蕩器上震蕩1分鐘以保證混和。加酶結(jié)合物應(yīng)用液和底物應(yīng)用液時(shí)可用定量多道加液器，使加液過程迅速完成。
維生素CELISA試劑盒的工作原理：
本試劑盒采用的是競爭法酶聯(lián)免疫吸附檢測技術(shù)（ELISA）。測定樣品中維生素D水平。向預(yù)先包被了維生素D抗原的酶標(biāo)孔中，加入標(biāo)準(zhǔn)品和樣本，溫育后，加入生物素標(biāo)記的抗維生素D抗體。再與HRP標(biāo)記的鏈霉親和素結(jié)合，形成免疫復(fù)合物，再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶，然后加入顯色底物TMB，產(chǎn)生藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成黃色。最后，在450nm處測定反應(yīng)孔樣品吸光度（OD）值，樣本中的維生素D濃度與OD值成反比，通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣本中維生素D的濃度。
維生素CELISA試劑盒的質(zhì)量操控方法：
1、規(guī)則操控目標(biāo)的標(biāo)準(zhǔn)預(yù)期值)。
2、確定操控的目標(biāo)。
3、丈量實(shí)數(shù)據(jù)。
4、對比或較對實(shí)數(shù)據(jù)與預(yù)期值之間的區(qū)別，并說明發(fā)生這一區(qū)別的因素，超出預(yù)訂差錯(cuò)規(guī)模，報(bào)警系宣布信號，反響通道中止。
5、制定或挑選操控辦法和手法。
6、采納舉動，處理區(qū)別，恢復(fù)原狀（原標(biāo)準(zhǔn)狀態(tài)）的手法發(fā)揮作用。
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