總前列腺特異抗原ELISA試劑盒操作步驟：

1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔，在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl，然后在di一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為180 ng/L，120 ng/L ，60 ng/L，30 ng/，15 ng/L）。

2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。

3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。

5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿(mǎn)洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。

7. 溫育：操作同3。

8. 洗滌：操作同5。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。

11. 測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘。

白細(xì)胞關(guān)聯(lián)免疫球蛋白樣受體2(LAIR2)重組蛋白

白細(xì)胞激活黏附因子(ALCAM)重組蛋白

白血病抑制因子(LIF)重組蛋白

白血病抑制因子受體(LIFR)重組蛋白

半胱氨酸蛋白酶抑制劑3(CST3)重組蛋白

半胱氨酸蛋白酶抑制劑A(CSTA)重組蛋白

半乳糖苷酶α(GLα)重組蛋白

半乳糖凝集素1(GAL1)重組蛋白

半乳糖凝集素14(GAL14)重組蛋白

半乳糖凝集素2(GAL2)重組蛋白

半乳糖凝集素3(GAL3)重組蛋白

半乳糖凝集素4(GAL4)重組蛋白

半乳糖凝集素7(GAL7)重組蛋白

半乳糖凝集素8(GAL8)重組蛋白

半乳糖凝集素9(GAL9)重組蛋白

半乳糖凝集素9B(GAL9B)重組蛋白

半乳糖凝集素9C(GAL9C)重組蛋白

胞外5'-核苷酸酶(NT5E)重組蛋白

胞外超氧化物歧化酶(SOD3)重組蛋白

苯酚磺基轉(zhuǎn)移酶(PST)重組蛋白

表面活性物質(zhì)關(guān)聯(lián)蛋白J(SPJ)重組蛋白

表皮生長(zhǎng)因子(EGF)重組蛋白

表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)重組蛋白

丙氨酸氨肽酶(AAP)重組蛋白

丙酮酸激酶(PK)重組蛋白

丙酮酸脫氫酶α(PDHα)重組蛋白

丙酮酸脫氫酶磷酸酶(PDP)重組蛋白

波形蛋白(VIM)重組蛋白

玻連蛋白(VTN)重組蛋白

補(bǔ)體1抑制因子(C1INH)重組蛋白

補(bǔ)體成分1r(C1r)重組蛋白

補(bǔ)體成分2(C2)重組蛋白